پروتئیناز K
پروتئینازK یک سرین پروتئاز پایدار و بسیار واکنش‌پذیر است، که انواع پیوندهای پپتیدی را هیدرولیز می‌کند. این آنزیم قادر به هضم کراتین مو است، از این رو، “پروتئیناز K” نامیده می شود. پروتئیناز K متعلق به خانواده subtilisin با جایگاه فعال کاتالیتیک (Asp39-His69-Ser224) می‌باشد. پروتئیناز K به دلیل مقاومت بالا در برابر عوامل دناتوره کننده از جمله تغییرات دما و pH، نمک‌های بافر و مواد شوینده (SDS)، دارای طیف عملکردی وسیعی می باشد. جایگاه برش غالب پروتئینازK، پیوند پپتیدی مجاور گروه کربوکسیل اسیدهای آمینه آلیفاتیک و آروماتیک با گروه های آلفا آمینه بلوکه شده است. بنابراین پروتئیناز K برای هضم کلی پروتئین ها و آنزیم ها در نمونه های بیولوژیکی مفید است. این آنزیم که توسط یون کلسیم فعال می شود و پروتئین ها را ترجیحاً پس از اسیدهای آمینه آبگریز (آلیفاتیک، آروماتیک و سایر اسیدهای آمینه آبگریز) هضم می کند. اگرچه یون‌های کلسیم بر فعالیت آنزیم تأثیر نمی‌گذارند، اما به پایداری آن کمک می‌کنند.
کاربرد‌ها
- مناسب جهت غیرفعال سازی پروتئولیتیک نوکلئازها در طول جداسازی DNA و RNA
- حذف اندوتوکسین‌های متصل به پروتئین‌های کاتیونی مانند لیزوزیم و ریبونوکلئاز A
- حذف نوکلئازها به منظور in situ hybridization
- مناسب جهت Protease footprinting
- مناسب جهت Mitochontrial isolation
- استخراج DNA ژنومی
- استخراج RNA سیتوپلاسمی
- استخراج RNA یا highly native DNA
- هضم پروتئین‌های ناخواسته در کاربردهای زیست‌شناسی مولکولی
- آنالیز ساختار غشا
- آنالیز ساختاری پروتئین ها
- تعیین محل آنزیم بر روی غشا
- هضم پروتئین‌ها از نمونه‌های بافت مغز برای پریون‌ها در تحقیقات انسفالوپاتی‌های اسفنجی شکل انتقال‌پذیر (TSE).
برای مشاهده محصول مسترمیکس 2x Taq کلیک کنید.
